Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 1

Bolsista: BIANCA SILVA PASSOS
Orientador(a): JACKLINE DE PAULA AYRES DA SILVA
Coorientador(a): Não informado
Resumo: Segundo a Organização Mundial de Saúde, quase 40% (1,9 bilhão) da população mundial está acima do peso, e cerca de 13% (650 milhões) são obesos. Dentre as crianças, 38,3 milhões de crianças abaixo dos cinco anos estão com sobrepeso ou obesidade, e dentre as crianças maiores de 5 anos e os adolescentes são 340 milhões nesta condição1. Um fato curioso é que o sobrepeso e a obesidade já matam mais do que a desnutrição. Diante destes números alarmantes e que vem crescendo a cada ano, muitas iniciativas estão sendo postas em prática com o objetivo de diminuir essa estatística que possui meios simples, baratos e eficazes de prevenção. Diversas complicações estão associadas à obesidade prolongada, tais como diabetes tipo 2, pressão alta, doenças cardíacas, esteatose hepática, dislipidemias, dentre outras, porém diante da recente pandemia de COVID-19, a obesidade foi observada como um dos fatores associados à um pior curso e desenvolvimento da doença, e diversos fatores associados aos mecanismos de inflamação decorrente da obesidade foram apontados como principais causas do pior prognóstico2. Células inflamatórias compõem o sistema de defesa ou imunológico e o desenvolvimento delas, bem como a correta ativação são importantes para a imunovigilância e combate às infecções. Entretanto, pouco é dito sobre o papel da obesidade e outros distúrbios metabólicos durante o processo de geração destas células de defesa, apesar de já existirem descrições que tanto condições de malnutrição3–5 quanto de sobrepeso6,7 podem gerar distúrbios no ambiente gerador destas células hematopoéticas, causando aumento de adipócitos na medula óssea6. Entretanto, pouco se sabe sobre as alterações decorrentes durante o processo de formação do sistema hematopoético da prole, bem como de seus efeitos a longo prazo8. Sabe-se que animais induzidos à obesidade durante a gestação apresentavam acúmulo de lipídeos nas placentas e que o fígado fetal exibiu aumento do número de macrófagos circulantes, células tronco hematopoéticas e de células ovais8. Assim, o objetivo deste trabalho é estudar as alterações na medula óssea e na hematopoese decorrentes de dietas hipercalóricas e modelos de mutação espontânea que estimulem o acúmulo de lipídeos corporais e explorar os mecanismos associados, principalmente àqueles relacionados a geração de células tronco hematopoéticas no feto em desenvolvimento. Para tal, utilizaremos modelos de camundongos com mutação espontânea que induzam obesidade e também alimentaremos camundongos Swiss Webster (machos e fêmeas) com dieta hipercalórica e trabalharemos com 4 grupos de acasalamento: 1) fêmeas obesas com machos normais, 2) machos obesos com fêmeas normais, 3) machos e fêmeas obesas e 4) machos e fêmeas normais, de forma que possamos avaliar a influência do sobrepeso e obesidade no processo de formação das células hematopoéticas da prole. Tantos os geradores (M/F) quanto a prole (F1) (E14-18 e 2 meses) terão os seus ossos e órgãos analisados histologicamente (coloração e imunomarcação), bem como serão avaliados os parâmetros hematológicos e bioquímicos no sangue periférico dos adultos. Ao final do estudo esperamos descrever as alterações observadas na medula óssea dos adultos, bem como as alterações encontradas nos órgãos hematopoéticos fetais (fígado e medula óssea) decorrentes do distúrbio metabólico, e nos aprofundarmos na descrição de alguns dos mecanismos associados.

Bolsista: Juan Carlos Claro da Rocha Buriticá
Orientador(a): LETICIA PESSOA MASSON
Coorientador(a): SIMONE SANTOS SILVA OLIVEIRA
Resumo: Saúde, trabalho e precarização em tempos de plataformas digitais: um olhar a partir dos Centros de Referência em Saúde do Trabalhador Justificativa e relevância As tecnologias de informação e comunicação permitiram que a oferta de bens e serviços pudesse ser efetivada por meio de plataformas digitais, conectando consumidores e prestadores de serviço. Sem deter patrimônio material significativo, “empresas-plataforma” rapidamente constituíram-se em poderosos gigantes corporativos (Slee, 2017). Configuram-se, por meio delas, relações sociais de trabalho marcadas pela retirada de direitos trabalhistas (Antunes, 2018). Em meio à pandemia em curso e à crescente demanda por serviços prestados por esses trabalhadores, a inserção deles nos equipamentos de Saúde se faz ainda mais necessária. Integrada no Sistema Único de Saúde (SUS) através da Rede Nacional de Atenção Integral à Saúde do Trabalhador (RENAST), a Saúde do Trabalhador (ST) deve colocar a ênfase de sua atuação em ações de Vigilância e Promoção da saúde no trabalho. O objetivo da RENAST é a inserção de ações referentes à saúde no trabalho nos serviços de atenção básica do SUS, assim como a implementação de ações de vigilância e promoção da saúde nos ambientes de trabalho (Minayo-Gomez, 2011). A despeito das investigações e intervenções nesse campo partirem das classes e grupos de trabalhadores organizados, uma parcela significativa da população brasileira encontra-se à margem da proteção e regulação estatal do trabalho, o que dificulta sua organização coletiva. Entendendo que esse campo de intervenção em ST não deva focalizar apenas os trabalhadores com vínculos formais de trabalho, propõe-se investigar as ações que vêm sendo desenvolvidas no âmbito da RENAST junto aos trabalhadores informais, especialmente aqueles que atuam via plataformas digitais. Destaca-se a importância do fortalecimento dos Centros de Referência em Saúde do Trabalhador (CEREST) como articuladores e organizadores de ações intra e intersetoriais de Vigilância em Saúde do Trabalhador. Neste sentido, este subprojeto pretende contribuir nas análises sobre o trabalho em plataformas digitais, com ênfase no desenvolvimento de ações de vigilância e promoção da saúde realizadas junto a esses centros. Objetivo geral: Compreender o quadro atual de ações sobre a relação trabalho-saúde de motoristas e entregadores por aplicativo, na perspectiva da construção de caminhos para o fortalecimento de dispositivos coletivos de vigilância e promoção da saúde. Objetivos específicos: Identificar a produção do conhecimento sobre a relação trabalho e saúde de trabalhadores por aplicativos; Conhecer a atuação dos CERESTs do estado do Rio de Janeiro junto a categorias de trabalhadores que atuam por plataformas digitais; Acompanhar o debate com os CERESTs para a implementação de ações voltadas ao trabalho de motoristas e entregadores por aplicativo. Metodologia: A pesquisa possui caráter qualitativo, a partir de uma perspectiva participativa dos sujeitos envolvidos no estudo. As etapas do subprojeto são: aproximação da temática e do campo de estudo; levantamento sobre a atuação dos CERESTs do estado do Rio de Janeiro a respeito de trabalhadores por aplicativos, por meio de entrevistas com profissionais destes centros; participação de “Encontros sobre o Trabalho” com motoristas e entregadores, acompanhando especialmente o debate sobre a interlocução com os CERESTs para a implementação de ações voltadas a esse público. Os resultados parciais centram-se principalmente na análise de materiais produzidos a partir dos EST e de entrevistas individuais com os trabalhadores, com foco na temática da relação saúde-trabalho, além do levantamento e leitura de materiais referentes ao campo da Vigilância em Saúde do Trabalhador.

Bolsista: ISABELE PESSOA RODRIGUES DA SILVA
Orientador(a): TANIA ZAVERUCHA DO VALLE
Coorientador(a): Não informado
Resumo: O debate sobre pobreza e dignidade menstrual vem crescendo nos últimos anos após a reconhecimento da ONU em 2014 sobre o direito das mulheres a uma higiene menstrual digna. Apesar disso, a discussão e ensino sobre menstruação e ciclo menstrual no Brasil ainda sofre de preconceitos. Muitas famílias consideram o tema como tabu, não dialogando com suas filhas e, mesmo nas escolas, vemos grandes lacunas sobre ensino de ciclo e saúde menstrual. Neste projeto pretendemos desenvolver um jogo de tabuleiro que possa ser usado como facilitador de diálogo e ferramenta de ensino em saúde nas escolas. Quando pronto, disponibilizaremos o jogo em formato “imprime e jogue” no site do IOC e plataforma Educare, de forma a atingir um público amplo.

Bolsista: Rafaela Scardini de OLiveira
Orientador(a): FLAVIA RAQUEL GONCALVES CARNEIRO
Coorientador(a): Nicolas Carels
Resumo: A leucemia linfoide aguda de células T (LLA-T) representa de 12% a 15% de todos os casos de LLA em crianças e 25% em adultos, sendo que 20% dos pacientes entram em recidiva dentro de 2 anos após o diagnóstico. A doença recorrente é muito difícil de ser curada. Nesta fase, o transplante de medula óssea é o único tratamento que pode levar à cura, mas a reintrodução da remissão é um pré-requisito e isso é um desafio. O presente projeto propõe a identificação de alvos terapêuticos através de uma nova abordagem onde os genes alvos serão identificados pela análise combinada do interatoma e transcriptoma humanos (Carels et al., 2015). É esperado que a inibição de proteínas de alta conectividade e superexpressas em células malignas promova maior desarticulação nas redes de sinalização e as encaminhem para morte celular com menor incidência de efeitos colaterais para os tecidos saudáveis. Portanto, os novos alvos a serem identificados vão representar proteínas superexpressas e com maior grau de conectividade. O objetivo geral desse projeto é identificar novos alvos terapêuticos para LLA-T e validar in vitro os 5 mais promissores. Objetivos específicos: 1) Quantificação dos transcritos a partir dos dados de RNA-seq disponíveis nos bancos de dados. Iremos analisar os dados de RNA-seq de linhagens celulares de LLA-T, pacientes e células T e timócitos não leucêmicos (controles). O perfil de expressão gênica será avaliado por meio da taxa de identidade das sequências (tags) de RNA-seq com o conjunto das sequências humanas (BLASTn). A contagem de tag por gene será normalizada de acordo com os métodos descritos por Mortazavi et al. (2008) e Bullard et al. (2010). Os valores de expressão (contagem dos tags após normalização) da célula maligna serão subtraídos dos valores de expressão do controle. Os valores positivos indicam aumento do nível de expressão nas células tumorais. Para selecionar os genes superexpressos, utilizaremos como limiar um intervalo de confiança de 99%, considerando uma classificação one tail na base da distribuição gaussiana. 2) Escolha das proteínas com maior grau de conectividade nos subinteratomas de genes regulados positivamente como sendo alvos terapêuticos Com a lista dos genes regulados positivamente iremos identificar o sub-interatoma correspondente por comparação com o interatoma da EBI. A associação dos dados de transcriptoma e de interatoma permitirá identificar as proteínas reguladas positivamente que apresentam o maior potencial de se conectar com outras (hubs). As 5 proteínas com maior potencial de conexões reguladas positivamente serão consideradas como alvos para os testes de validação in vitro. 3) Knockdown dos alvos pela técnica de RNAi e/ou Knockout por Crisper/CAS9. Para a validação dos genes, usaremos linhagens celulares derivadas de LLA-T e, como controle, linfócitos do sangue periférico de doadores não portadores de leucemia para avaliarmos o efeito do knockdown/knockout dos genes. O knockdown dos alvos será feito pela técnica de RNAi. Moléculas de shRNA específicas para os genes identificados nos objetivos 1 e 2 serão adquiridas comercialmente e as linhagens celulares derivadas de LLA-T assim como os linfócitos controle, serão transduzidas os vetores contendo os shRNA de forma individual ou em conjunto. Alternativamente, o knockout dos genes poderá ser feito via Crisper/CAS9. Posteriormente a proliferação, viabilidade e apoptose serão avaliados. 4) Avalição da viabilidade e proliferação celular: Realizaremos contagem das células usando azul de tripan para verificar a proliferação celular e ensaios de cristal violeta e MTT (brometo de 3-(4,5-dimetil tiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazólio) para detectar a viabilidade das células. A apoptose será avaliada por citometria de fluxo, através da marcação das células com anexina V e iodeto de propídeo. Carels N et al., 2015. PLoS One 10(1):e0115054 Mortazavi A et al., 2008. Nat Methods. 5:621–628 Bullard JH et al., 2010. BMC Bioinformatics. 18:11-94.

Bolsista: GUSTAVO AUGUSTO FONSECA NOGUEIRA
Orientador(a): Vanessa Peruhype Magalhães Pascoal
Coorientador(a): LUANA OLIVEIRA BORGES FERNANDES
Resumo: A leishmaniose visceral (LV) é uma doença causada por protozoário do gênero Leishmania. As células alvo para a Leishmania são os fagócitos mononucleares como os monócitos/macrófagos e avaliar a relação parasito-fagócito e a interação fagócito-linfócito é fundamental para o entendimento dos desfechos da doença. Pouco se sabe sobre o papel do MR1, receptor relacionado ao MHC-I e associado à ativação de células T invariantes associadas a mucosa (MAIT), em doenças causadas por protozoários, especialmente o impacto que o bloqueio exerce sobre o perfil de biomarcadores produzidos pelos fagócitos, células MAIT e outros leucócitos presentes no sangue periférico. Nesse sentido, o presente estudo avalia o impacto do bloqueio do MR1 no perfil de produção de diferentes biomarcadores imunológicos por leucócitos do sangue periférico no contexto da LV humana. Para tanto, amostras de sangue periférico de indivíduos saudáveis, não infectados (NI), indivíduos infectados com L. infantum, porém assintomáticos (AS) e pacientes com LV clássica, que foram avaliados antes (LV-PRÉ) e após o tratamento (LV-PÓS), foram cultivadas na presença ou ausência de formas promastigotas de L. infantum e do bloqueio anti-MR1. A avaliação do perfil de biomarcadores imunológicos foi realizada nos sobrenadantes das culturas. Na LV clássica, o bloqueio de MR1 induziu aumento dos níveis de IL-1b e TNF associado a citocinas moduladoras IL-5, IL-9 e IL-33. De maneira interessante, após o tratamento, o bloqueio de MR1 promoveu aumento de CXCL8, TNF, IL-17 e VEGF, associada a presença de níveis elevados de IL-9 e IL-1Ra. No grupo AS, observamos redução nos níveis de IL-1b e IL-6 após bloqueio de MR1, já para NI, observamos aumento de IL-22 e IL-33. Quando avaliamos as assinaturas de alto produtores, observamos forte impacto exercido pelo bloqueio de MR1 no perfil de alto produtores de citocinas pró-inflamatórias e fatores de crescimento no grupo AS. Por outro lado, na LV clássica, a presença de alto produtores de IL-10 e IL-27 é marcante e se mantém forte mesmo com o bloqueio da via de ativação de células MAIT. De modo geral, os resultados mostram que o MR1 se apresenta importante para a produção e secreção de citocinas pró-inflamatórias e do eixo Th17, mostrando um papel possivelmente protetor das células restritas ao MR1 na LV.

Bolsista: SOFIA LIRIO SANTOS SILVA
Orientador(a): Natalia Machado Tavares
Coorientador(a): Sara Nunes de Oliveira Araujo
Resumo: As leishmanioses são um complexo de doenças negligenciadas causada por um parasito protozoário do gênero Leishmania que atinge cerca de 12 milhões de pessoas no mundo. A leishmaniose cutânea (LC) é a forma mais frequente dessa doença. No Brasil, a principal espécie causadora dessa forma cutânea da doença é a Leishmania braziliensis (Lb). A LC é caracterizada por lesão(s) cutânea(s) ulceradas(s) com bordas elevadas e centro necrótico, uma doença com uma inflamação crônica descontrolada e exacerbada. A reprogramação de transcritos celulares do hospedeiro permite a modulação da expressão de genes relacionados à resposta imune e sua alteração por microrganismos. Neste processo, pequenos RNAs não-codificantes têm um papel fundamental. Os microRNAs (miRNAs), pequenos RNAs endógenos não codificantes, surgiram nos últimos anos como moléculas-chave na regulação da expressão gênica. Dados do nosso grupo mostraram que o perfil de expressão do miR-205 encontra-se inibido na LC e em outras doenças inflamatórias de pele como, Psoríase, Lúpus e Hanseníase. Esses achados reforçaram a hipótese de que esse miRNA pode exercer um papel importante em diferentes doenças inflamatórias de pele independente da sua etiologia. Então, validamos o perfil de expressão do miR-205 em novas biópsias de pacientes com LC e em queratinócitos humanos imortalizados (HaCats) expostos a Lb, diante de lesões mecânicas. Esses dados mostraram que a exposição por Lb reduz a expressão do miR-205. Além disso, realizamos ensaios de proliferação e migração celular, uma vez que a literatura associa tais habilidades como eixo funcional desse miRNA. O miR-205 parece não interferir na capacidade de proliferação da célula frente a exposição a Lb, no entanto, ele regulou a migração dessas células, dado que o percentual de fechamento de lesão no ensaio in vitro foi maior nos grupos transfectados com esse miRNA e menor com a exposição a Lb. Sendo assim, o objetivo desse trabalho é avaliar o papel do miR-205 na migração de queratinócitos humanos expostos a Leishmania braziliensis. Para isso, queratinócitos humanos serão expostos a Lb por 4 ou 24 horas mediante lesões mecânicas a fim de avaliar marcadores de migração, formação de complexos de adesão e podossomos por microscopia de fluorescência. Será realizado também, ensaios para avaliação da capacidade de migração dos queratinócitos em ambientes bidimensionais e tridimensionais frente a indução do miR-205 e exposição ao parasito. Dessa forma, entender os mecanismos moleculares do miR-205 no processo de migração de queratinócitos expostos a Lb e sua relação com o fechamento da ferida são fundamentais para propor novas estratégias terapêuticas.