Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 1

Bolsista: JULIA SOUZA DE PAULA OLIVEIRA
Orientador(a): MARCELO PELAJO MACHADO
Coorientador(a): Não informado
Resumo: A reação granulomatosa, característica de inflamações crônicas nas quais há predomínio de células do sistema fagocítico mononuclear, é a principal expressão fisiopatológica da esquistossomose mansônica. Esta possui uma estrutura tridimensional compacta e organizada que, junto com as células do órgão afetado, dispõem-se em uma matriz extracelular heterogênea, circundando o ovo – o qual libera antígenos e induz a própria formação da estrutura. No granuloma esquistossomótico hepático maduro é possível distinguir três zonas: central, medial e periférica. Nesta última, principalmente em meio às fibras reticulares, é possível observar a presença de hematopoese extramedular, a qual é regulada localmente e exerce a função de ampliar ou compensar a resposta proliferativa hematopoiética, tendo início por volta do 40º dia pós infecção. Estudos anteriores, inclusive de nosso grupo, já demonstraram topologicamente a presença de hematopoese extramedular nos granulomas e na área subendotelial de alguns vasos sanguíneos, bem como diferenças encontradas na resposta hematopoética medular frente à infecção esquistossomótica. Ensaios in vitro mostraram a presença de células formadoras de colônia nestes granulomas, provavelmente provenientes da medula óssea, que podem ser totipotentes, mas não apresentam capacidade in vitro de autorenovação ao longo do tempo. Ademais, alguns estudos indicam que proteoglicanos contendo heparansulfato podem estimular e controlar a proliferação in situ de células mielóides presentes tanto no espaço perigranulomatoso, quanto nos infiltrados celulares dispostos no fígado. Neste projeto, nos propomos a aprofundar a caracterização do ambiente medular durante a infecção, com vistas também à análise da migração de células tronco hematopoéticas e mesenquimais. Além disso, investigaremos o efeito dos antígenos ovulares solúveis, na ausência da infecção esquistossomótica, sobre a atividade da medula óssea e verificar possíveis mudanças nas populações celulares circulantes no sangue periférico.

Bolsista: MARIA EDUARDA MOREIRA DA COSTA MIRANDA
Orientador(a): DALIA DOS PRAZERES RODRIGUES
Coorientador(a): Não informado
Resumo: A cadeia de abastecimento alimentar se torna cada vez mais globalizada e integrada desde o final da década de 1980, resultando no aumento das doenças de transmissão alimentar (DTA). Na atualidade mais de 250 doenças transmitidas por alimentos e água são conhecidas, podendo ser ocasionadas por vírus, bactérias, protozoários, fungos, etc. Entre os prevalentes, estão os de comprometimento entérico, onde Salmonella spp apresenta número de casos altos. Atualmente é adicionado o aumento da resistência aos antimicrobianos, fator de relevância tanto em saúde pública quanto sanidade animal. Particularmente as enterobactérias desempenham importante papel, como receptores ou doadores de genes de resistência, seja em nível clonal ou informações genéticas adquiridas, relevantes para a difusão entre bactérias que vivem no mesmo habitat. Neste contexto, microrganismos do gênero Salmonella possuem papel importante como receptores ou doadores de genes. Entre estes o aumento significativo na resistência às cefalosporinas e fluoroquinolonas é altamente relevante porque estas drogas são as principais opções terapêuticas nos dias de hoje. A contrapartida microbiana para as cefalosporinas são mais de 2.000 betalactamases e para as fluoroquinolonas, por mecanismos associados a modificações no sítio de ação do fármaco, como mutações cromossômicas ou genes mediados por plasmídeos. Entre quinze e vinte anos atrás, a resistência às fluoroquinolonas era rara em nosso meio, condição totalmente distinta, reconhecida em estudo retrospectivo do LRNEB/FIOCRUZ, dos últimos dez anos de monitoramento. Na atualidade estamos vivenciando uma situação pandêmica, representada pela síndrome respiratória aguda grave pelo coronavírus 2=SARS-CoV-2 (COVID-19). Entre as diferentes opções terapêuticas, vem sendo empregada a cloroquina e hidroxi-cloroquina, usadas no tratamento da malária e eficazes na redução da replicação viral em coronavírus associado à SARS e MERS. Seu poder foi reconhecido e difundido por padres jesuítas, tendo sido extraído de uma árvore que contém vários alcalóides, entre os quais o quinino. Diferentes alterações deste levaram a obtenção do ácido nalidíxico. O aumento de resistência a drogas de última geração em enterobactérias é resultado do uso sem controle efetivo no homem, setor agrícola e cadeia de produção de alimentos. Contudo tais assertivas representam hipóteses, cuja avaliação molecular do perfil genético de resistência, representam sua comprovação. Para tal, no presente projeto serão avaliados, dois grupos distintos de amostras, cuja distribuição das atividades do bolsista PIBIC se dará de modo igualitário, ao longo do período de vigência da bolsa. O primeiro, inicialmente será avaliada a evolução da resistência às fluoroquinolonas em Salmonella spp. As cepas, selecionadas no Banco de Dados do Lab. Enterobactérias no período de 2017 a 2020 e isoladas de diferentes fontes da cadeia alimentar e regiões do país, serão avaliadas através da PCR quanto a presença dos genes de mutação e natureza plasmidial. A partir de 2020 e durante toda a vigência do projeto, as resistentes ou de resultado intermediário serão submetidas ao MIC para antimalárico em diferentes concentrações de acordo com CLSI/EUCAST, objetivando conhecer a resistência cruzada entre antimalárico e as fluoroquinolonas. O segundo inclui cepas de Escherichia coli resistentes ao antimicrobiano, isoladas a partir da condição pandêmica atual, de diferentes fontes provenientes de dois estados situados em regiões geográficas distintas, um dos quais endêmico de malária (Amapá). Nestas será possível avaliar o impacto do uso de antimalárico no aumento da resistência cruzada com as fluoroquinolonas sendo em seu conjunto possível além de monitorar a prevalência de enteropatógenos portadores de genes de resistência, conhecer a dispersão dos elementos genéticos e seu papel nas diferentes fontes da cadeia alimentar

Bolsista: Gabriella Cristina Lopes Calazans
Orientador(a): PAULO RUBENS GUIMARAES BARROCAS
Coorientador(a): SHEILA DA SILVA DUQUE
Resumo: A presença de poluentes orgânicos e inorgânicos apresenta-se como um problema em todo o mundo, decorrente da sua utilização doméstica, clínica, agrícola e industrial intensiva. Nesse contexto, a poluição por biocidas e antibióticos tem sido detectada em níveis crescentes, contribuindo com o surgimento de bactérias resistentes capazes de transferir material genético entre amostras da mesma espécie ou de espécies diferentes, e se adaptar rapidamente a fatores adversos. A resistência bacteriana pode ser considerada uma resposta dos micro-organismos devido à pressão seletiva que a presença dos poluentes exerce no ambiente, sendo observada em bactérias uma associação frequente entre a resistência a mercúrio e a antibióticos. Nesse estudo, daremos continuidade à caracterização de 350 isolados bacterianos resistentes a mercúrio obtidos de ecossistemas aquáticos brasileiros nos últimos quinze anos. Para isso, serão utilizados a técnica de espectrometria de massa MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization – Time of Flight) para identificação das espécies bacterianas e a técnica de difusão de discos em ágar para a verificação da suscetibilidade dos isolados bacterianos aos fármacos antimicrobianos associados com maior frequência à resistência simultânea ao mercúrio e antibióticos. Ao final dos testes de caracterização fenotípica, conheceremos a identidade taxonômica e o perfil de resistência das espécies bacterianas que compõem essa coleção de trabalho, o que tornará possível a avaliação e seleção das cepas mais promissoras para posterior utilização na biorremediação ex situ da poluição ambiental por mercúrio.

Bolsista: Tássia Cordeiro Brum Machado
Orientador(a): PAULO VICTOR DE SOUSA VIANA
Coorientador(a): NATALIA SANTANA PAIVA
Resumo: Introdução: As crianças com tuberculose (TB) têm sido historicamente uma população negligenciada, estima-se que cerca de 1 milhão de crianças desenvolvam TB a cada ano (WHO, 2021). No entanto, a maioria dessas crianças nunca é diagnosticada ou tratada para sua doença, e segundo estimativas recentes da Organização Mundial de Saúde (OMS) ocorreram 208.000 mortes de crianças devido à TB em todo o mundo em 2019 (WHO, 2021). A Tuberculose Drogarresistente a medicamentos (TBDR, referindo-se a qualquer resistência aos medicamentos para TB), especialmente TB multirresistente (TBMR, definida como Mycobacterium tuberculosis com resistência a pelo menos isoniazida e rifampicina), é uma ameaça contínua em crianças e adultos e mais de 30.000 crianças tinham TBMR no mundo em 2019. Até onde sabemos, ainda são escassos estudos que se concentraram em padrões de resistência a medicamentos, incluindo tuberculose monorresistente, TBMR, tuberculose polirresistente e tuberculose extensivamente resistente a medicamentos (TB-XDR) em crianças em todo o mundo, e muito pouco se sabe sobre a magnitude desta doença e sua resistência aos medicamentos em crianças (Jenkins et al., 2014; Ködmön et al., 2017). As principais razões, segundo alguns autores, são as dificuldades para um correto diagnóstico, uma vez que as crianças geralmente apresentam sintomas inespecíficos e a confirmação bacteriológica é difícil. A coleta de escarro é particularmente complexa em crianças menores de dez anos. Mesmo que amostras biológicas sejam obtidas, o resultado pode ser falso-negativo. Portanto, o diagnóstico de TB em crianças é um desafio, apesar da disponibilidade de tecnologias modernas, como os testes de amplificação de ácido nucleico (NAAT) (Marais et al., 2020). Objetivos: Descrever características clínicas e sociodemográficas, estimar a carga de adoecimento entre os casos de TBDR notificados nas crianças e adolescentes no Brasil. Metodologia: Estudo de coorte retrospectiva de casos de TBDR notificados no Sistema de Informação de Tratamentos Especiais de Tuberculose (SITETB), no período de 1º de janeiro de 2012 a 31 de dezembro de 2019. Serão excluídos os registros duplicados ou aqueles em que a situação de encerramento foi "mudança de diagnóstico". Este estudo explorará as seguintes covariáveis: sexo (masculino ou feminino); faixa etária (0-4 anos, 5-9 anos, 10-14 anos e 15-19 anos); raça/cor (branca, preta, parda, amarela e ignorada); forma clínica (pulmonar, extrapulmonar e mista); ano; padrão de resistência (monorresistência, multirresistência, polirresistência e resistência extensiva); tipo de resistência (primária ou adquirida) e tipo de entrada (caso novo, reingresso após abandono, falência, recidiva, mudança de resistência e outros). Serão realizadas análises das características clínicas e epidemiológicas dos casos TBDR notificados, a fim de caracterizar a população do estudo por meio de distribuições de frequências, medianas e intervalo interquartílico para as variáveis quantitativas serão calculadas. As diferenças entre as proporções entre os grupos serão comparadas utilizando-se o teste do qui-quadrado (?2) ou, quando a frequência esperada das tabelas de contingência for menor ou igual a 5, utilizará o teste exato de Fisher. Para as variáveis contínuas, foi utilizado o teste não paramétrico de Wilcoxon-Mann-Whitney. Um valor de p < 0,05 será considerado estatisticamente significativo. As análises deste trabalho serão implementadas no ambiente livre R 4.1.1. Por fim, o principal ensejo deste estudo é contribuir com a pesquisa científica e a formação de jovens pesquisadores no campo da saúde da pública, com vistas a ampliar o conhecimento sobre o controle e o acompanhamento dos casos de TBDR entre crianças e adolescentes do Brasil. Referências Bibliográficas Jenkins HE, Tolman AW, Yuen CM, Parr JB, Keshavjee S, Pérez-Vélez CM, et al. Incidence of multidrug-resistant tuberculosis disease in children: systematic review and global estimates. Lancet (London, England). (2014) 383:1572–9. doi: 10.1016/S0140-6736(14)60195-1 Ködmön C, van den BoomM, Zucs P, van derWerfMJ. Childhood multidrug- resistant tuberculosis in the European Union and European Economic Area: an analysis of tuberculosis surveillance data from 2007 to 2015. Euro Surv Bull Eur sur les Maladies Trans Eur Commun Dis Bull. (2017) 22:17- 00103. doi: 10.2807/1560-7917.ES.2017.22.47.17-00103 Marais BJ, Amanullah F, Gupta A, Becerra MC, Snow K, Ngadaya E, et al. Tuberculosis in children, adolescents, and women. Lancet Respir Med. (2020) 8:335–7. doi: 10.1016/S2213-2600(20)30077-1 WHO. Global Tuberculosis Report. (2021). Disponível em: https://www.who.int/publications/i/item/9789240037021

Bolsista: LARA CORREA UMPIERRE HENRIQUES
Orientador(a): MARIA DE LOURDES AGUIAR OLIVEIRA
Coorientador(a): RENAN DA SILVA FAUSTINO
Resumo: Dados a morbimortalidade, impacto econômico e o potencial pandêmico, a gripe e a COVID-19 compõe programas de vigilância da OMS e MS1–3. Juntamente com outras viroses respiratórias figuram dentre as principais causas de absenteísmo4–7. Essas viroses apresentam amplo espectro clínico, variando de infecções assintomáticas ao óbito8–10. Após a exposição viral, o período de incubação da gripe costuma ser curto (até 1-4, média 2 dias) em contraste com a COVID-19 (entre 1-14, média 5-6dias)11,12. Cerca de 48.0% e 80.0% dos pacientes podem ser assintomáticos, respectivamente9,13,14 e capazes de transmitir o vírus. As categorias sob maior risco para doença grave/exposição, figuram idosos, indivíduos com comorbidades, gestantes e profissionais de saúde10,15–17. Esses vírus apresentam alta transmissibilidade18,19 e são disseminados de pessoa a pessoa por gotículas de saliva, secreção respiratória ou aerossóis20,21 e, por contato indireto através de superfícies e objetos contaminados22,23. Podem se manter viáveis e superfícies sólidas por algumas horas21,23,24, sendo ainda excretados nos sistemas de escoto e no ambiente, onde a presença do RNA viral torna-se indicador da presença de infectados no território. A epidemiologia baseada em esgoto tem sido usada com sucesso para o monitoramento de patógenos no nível populacional25–27. Muitos países do norte global adotaram o monitoramento sistemático de vírus respiratórios, Poliovírus e outros vírus de relevância pública em águas residuais28,29. Diversos estudos evidenciaram que o aumento da concentração de SARS-CoV-2 em águas residuais precede o aumento da incidência de novos casos na comunidade, consistindo num sistema eficiente de alerta precoce26,30,31. Assim, a vigilância ambiental é estratégica para o monitoramento da dinâmica epidemiológica e evolutiva viral32. A vigilância ambiental também permite monitorar a introdução de novas variantes virais 33–35 e com real representatividade temporal e geográfica. Portanto, constitui uma abordagem estratégica para acompanhamento efetivo da dinâmica epidemiológica e evolutiva viral, de modo a aperfeiçoar a nossa capacidade de intervenção e resposta. O presente projeto consiste em estudo piloto para o monitoramento da circulação de vírus respiratórios (SARS-CoV-2, Influenza) em esgoto coletado em 3 pontos estratégicos da cidade do Rio de Janeiro. Essa abordagem ainda não se encontra implementada no contexto da vigilância em saúde no município, de modo que constitui objeto de interesse e colaboração entre da Secretaria Municipal de Saúde e o Laboratório de Referência Nacional (Ministério da Saúde) e Internacional (OMS) para Virus Respiratórios e Enterovírus da Fiocruz. Essas informações são centrais para a construção e implementação do modelo de vigilância baseada em esgoto enquanto sistema de alerta precoce no nosso município e no país – uma inovação relevante no contexto da vigilância em saúde e central para o enfrentamento e resposta à surtos, epidemias e emergências sanitárias.

Bolsista: TAINA DOMINONI BIANCHIN
Orientador(a): Rafi ur Rahman
Coorientador(a): DANIELE PEREIRA DE CASTRO
Resumo: O desenvolvimento de novos produtos de controle de mosquitos é importante para substituir métodos que não demonstram eficácia devido à resistência aos inseticidas, e para aumentar o leque de possíveis estratégias a aplicar no manejo integrado de vetores [1, 2]. Óleos essenciais (OE) são misturas de compostos do metabolismo das plantas produzidos para se protegerem contra microrganismos e insetos. Estes óleos já demonstraram ter potencial para serem usados como larvicidas de mosquito vetores [3], mas a sua integração como inseticidas em programas de manejo integrado de vectores (IVM) ainda não foi realizada [4]. A aluna Tainá Dominoni Bianchin será inserida no projeto “Um larvicida ambientalmente amigável para controle de mosquitos”, focando na caraterização do impacto que os óleos encapsulados em levedura têm na diversidade bacteriana dos criadores larvares e no comportamento de oviposição do mosquito Aedes aegypti. Os óleos com propriedades atrativas/estimulantes para oviposição podem ser utilizados para melhorar armadilhas focadas nas fêmeas grávidas evitando a postura de ovos em ambientes naturais, o que quebra o ciclo reprodutivo do mosquito, enquanto óleos repelentes/dissuasores da oviposição permitem criar estratégias para proteger locais tipicamente usados por mosquitos como criadores larvares, especialmente aqueles que não podem ser removidos do seu ambiente ou apresentam valor económico (e.g. reservas de água potável; produtos industriais ou comerciais, tais como pneus e plantas). Este subprojeto vai permitir entender se o larvicida altera a flora bacteriana após o tratamento e como isso poderá alterar a oviposição dos mosquitos. Para desenvolver a revisão bibliográfica sobre o impacto das bactérias e metabolitos bacterianos na oviposição de mosquitos Aedes aegypti usaremos a estratégia de organização de pesquisa bibliográfica denominada SPIDER (Sample, Phenomenon of Interest, Design, Evaluation, Research Type) [5]. Na parte experimental do projeto, três óleos essenciais encapsulados em leveduras serão utilizados no nosso subprojeto (óleos serão mantidos em sigilo). Ensaios de oviposição em semi-campo serão realizados dentro gaiola Pop-up com mangas (W60 x D60 x H90 cm) em condições ambientais com luz natural e flutuação de temperatura num pátio protegido da chuva, usando quatro ovitrampas (duas tratados vs. duas controles) serão inseridas dentro de uma gaiola pop-up (uma armadilha em cada canto) com um padrão diagonal que varia ao longo dos ensaios evitando o enviesamento associado à localização da ovitrampa. Em cada gaiola, uma fêmea grávida é inserida dentro de uma gaiola Pop-up para inferir o número de ovos postos em cada condição após 24 h à 72 h. O número de ovos é contado nas placas de madeira e na solução para todas as ovitrampas. Este procedimento será repetido quatro vezes para cada OE/concentração rodando a posição das ovitrampas. O índice de atividade da oviposição (OAI) [6] será utilizado para inferir a atratividade/repelência da substância à oviposição. Para verificar o impacto dos larvicidas de óleo essencial na população bacterianas dos criadouros larvares, a técnica de Espectrometria de Massa Maldi-Tof será aplicada em dois tipos de criadores larvares (pneus e recipientes de plástico) para identificar proteínas de bactéria de forma a identificar as bactérias e estimar a diversidade microbiana da amostra. Numa segunda fase, os ensaios de oviposição e a técnica de Espectrometria de Massa Maldi-Tof serão combinadas para verificar grupos bacterianos com maior impacto negativo ou positivo na oviposição do mosquito Aedes aegypti. Referências [1] Moyes C.L. et al. (2017) PLoS Negl Trop Dis,11(7): e0005625. [2] Achee NL et al. (2019) PLoS Negl Trop Dis, 13(1):e0006822. [3] Dias C.N. &amp; Moraes D.F. (2014) Parasitol Res,113(2):565-592. [4] Pavela R et al. (2019) Acta Trop, 193:236–71. [5] Cooke A et al. (2012) Qual Health Res, 22(10):1435-1443. [6] Kramer WL &amp; Mulla MS (1979) Environ Entomol, 8(6):1111-1117.