Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 1

Bolsista: ALDALEIA DO NASCIMENTO E SILVA
Orientador(a): ANDREZA SORIANO FIGUEIREDO NUNES
Coorientador(a): JAQUELINE MENDES DE OLIVEIRA
Resumo: A infecção pelo vírus da Hepatite E (HEV) é uma importante causa de hepatite aguda no mundo. A transmissão do genótipo zoonótico (gt3) ao homem pelo consumo da carne de diferentes espécies animais, incluindo domésticas e silvestres (p. ex. coelho e camelo), sugeriu a ocorrência de outras fontes de infecção além dos suínos (reservatórios). Os equídeos são susceptíveis à infecção pelo HEV e constituem possível fonte de exposição ao homem pelo consumo da carne e pelo contato direto. A circulação do HEV em animais no Brasil foi demonstrada no rebanho suíno, em javalí e roedor silvestres, canino e bovino, não havendo qualquer informação sobre a presença em equídeos, apesar de o país desempanhar papel importante na exportação de carne e de cavalo vivo. O Brasil já ocupou o sexto lugar mundial no volume de abate e o 14? lugar na exportação da carne, além disso, tem infraestrutura e legislação para o abate equídeo. Entretanto, não dispõe de um sistema de produção voltado para a atividade que contemple ações de acompanhamento sanitário que garantam a sanidade animal e a segurança alimentar. Nesse contexto, pode-se citar a população de equídeos empregada no trabalho de tração para pequenos fretes, lixo reciclável, etc, que são mantidos em centros urbanos e periferias, convivendo em ambientes diversos com suínos, roedores e caninos. Portanto, constituem potencial fonte de exposição ao homem via contato direto ou via consumo da carne (caso sejam encaminhados ao abate). Ressalta-se que agentes infecciosos transmitidos pelo consumo da carne não são investigados na linha de abate configurando como um problema em saúde púplica negligenciado. O objetivo geral deste estudo transversal é investigar a exposição prévia de equinos à infecção pelo HEV através da busca por anti-HEV IgG em amostras de soro. O total de 385 amostras será avaliado (192 equinos da linha de abate e 193 equinos de trabalho de tração) tomando-se como base o tamanho do rebanho equino (5.962.126 animais) e uma frequência de infecção de 50% (nível de significância 95%). Será empregado um kit comercial humano modificado pela adição de conjugado de cabra anti-IgG equino (Equus ferus caballus) marcado com peroxidase. O valor de cutoff será determinado de acordo com estudos semelhantes, adotando um limiar conservador (5X o desvio-padrão). Todas as amostras coonsideradas positivas serão repetidas em duplicata e avaliadas quanto a presença do genoma viral. Este trabalho pretende estabelecer o protocolo de detecção de anticorpos anti-HEV em equinos e investigar a circulação do HEV zoonótico nestes animais de forma a contribuir com a melhoria das condições sanitárias da equinocultura brasileira, além de estudar a potencialidade destes animais como reservatórios.

Bolsista: Lucas Eliseu Santos Martins
Orientador(a): PATRICIA MACHADO RODRIGUES E SILVA MARTINS
Coorientador(a): Fernanda Verdini Guimarães Abreu
Resumo: O ingresso no Laboratório de Inflamação ocorreu no mês de fevereiro passado, e frente a questões de burocracia institucional não foi permitida minha presença física imediata, o que fez com que as principais atividades consistiram em assimilar o funcionamento de toda a instalação na qual o laboratório está compreendido, a dinâmica no dia-a-dia da pesquisa e toda a ética e biossegurança envolvidas nesse processo que são imprescindíveis. Tive, também, a oportunidade de realizar algumas atividades rotineiras ao laboratório de pesquisa incluindo pesagem de substâncias em balança de precisão, preparo de soluções como por exemplo a salina isotônica (0,9%), utilizada dissolução de compostos administrados em animais de experimentação, além de treinamento no uso de pipetas automáticas. Além disso, acompanhei a realização de um ensaio experimental no qual foram utilizados camundongos Swiss-Webster. Foi demonstrada a forma de imobilização dos animais e posterior demonstração de vias de administração de drogas como a instilação intranasal e a exposição por via orofaríngea. Foram também apresentadas outras técnicas, como sistema de pletismografia de corpo inteiro invasiva para avaliação de mecânica respiratória e método de obtenção de tecido pulmonar para processamento histológico, e para congelamento com posterior análises de conteúdo de proteínas (Bradford), conteúdo de colágeno (Sircol) e de mediadores inflamatórios (ELISA). Todas as atividades realizadas foram anotadas de forma a constituir uma fonte de memória, para posteriormente serem inseridas em sistema de gerenciamento de dados que é utilizado por todos os membros do laboratório.

Bolsista: LAURA DA CUNHA ALVES
Orientador(a): CLAUDIA MARIA VALETE
Coorientador(a): ANANDA DUTRA DA COSTA
Resumo: Introdução: A Toxicidade Coclear (TC) pode ser definida como perda parcial ou total da função auditiva da cóclea em decorrência do uso de fármacos, geralmente com finalidades terapêuticas, ou por exposição a substâncias tóxicas. O Antimoniato de Meglumina (AM) é o fármaco de primeira escolha no tratamento da leishmaniose tegumentar americana (LTA) e foi recentemente associado à toxicidade coclear por estudos realizados no INI-Fiocruz. Justificativa: A classificação de gravidade da TC se faz importante para traçar uma conduta assertiva e precoce nos pacientes, de forma a evitar danos permanentes com prejuízos funcionais e/ou sociais. Objetivo: Classificar a gravidade da Toxicidade Coclear pelo Antimoniato de Meglumina e suas respectivas condutas clínicas. Método: Estudo longitudinal retrospectivo em uma amostra de conveniência composta por pacientes com LTA, tratados com AM,atendidos entre outubro de 2008 e dezembro de 2018 no INI-Fiocruz e participantes do projeto & quot; Ensaio clínico fase III para leishmaniose tegumentar americana”. Os pacientes foram submetidos a avaliação audiológica com audiometria tonal limiar (ATL), audiometria de altas frequências (AAF) e otoemissões acústicas (OEA). Para a classificação de gravidade da TC, serão determinados os pontos de corte para as várias frequências das ATL, AAF e EOA a partir da curva característica de operação (curva ROC). Resultados esperados: Esperamos elaborar uma classificação de gravidade da Toxicidade Coclear ao AM, que permita traçar a conduta clínica apropriada para cada grau, inclusive para outros medicamentos ototóxicos.

Bolsista: Victor Rodrigues Gomes Braga
Orientador(a): VICTOR DO VALLE PEREIRA MIDLEJ
Coorientador(a): Não informado
Resumo: A tricomoníase é a infecção sexualmente transmissível não viral mais comum do planeta provocada pelo parasito Trichomonas vaginalis. Anualmente, cerca de 150 milhões de pessoas são infectadas por T. vaginalis em todo o mundo, superando índices de gonorreia e sífilis. Os homens, em sua maioria são assintomáticos, entretanto as mulheres são as mais acometidas pela doença. A infecção pode acarretar uma série de complicações nas mulheres como aborto, infertilidade, contribui com neoplasias cervicais e câncer do colo de útero. Além disso, pode facilitar a entrada de outros patógenos como os vírus HIV e HPV. O tratamento de rotina para a doença é baseado na administração de compostos imidazólicos, dentre eles o mais usado é o Metronidazol, (MTZ). Entretanto, sabe-se que os parasitos podem se tornar resistentes ao fármaco e ainda, que o uso do MTZ está associado ao aparecimento de vários efeitos colaterais indesejados em humanos, como neurotoxicidade. Grávidas não podem fazer uso do medicamento pois tem potencial teratogênico. Sendo assim, a busca por outros compostos é essencial ao tratamento da tricomoníase. Levando em consideração a eficácia do MTZ, nossa proposta é utilizar ferramentas de análise in silico para otimização do MTZ, visando melhorar a eficácia e reduzir toxicidade. Nesse cenário, novos derivados imidazólicos serão sintetizados com base na estrutura do MTZ e na análise de estruturas ativas contra T. vaginalis disponíveis no banco de dados ChEMBL. Além do perfil citotóxico e atividade contra T. vaginalis, as propriedades físico-químicas e relação estrutura-atividade (SAR, structure-activity relationships), incluindo o novo conceito de mapas de similaridade estrutura-atividade (SAS maps, structure–activity similarity maps), dos derivados sintetizados serão analisadas. Assim, este projeto visa otimizar o MTZ e identificar, através de ensaios pré-clínicos, compostos potencialmente ativos contra T. vaginalis.

Bolsista: Augusto Martins Moreto Silva
Orientador(a): JOSE DILERMANDO ANDRADE FILHO
Coorientador(a): Débora Cristina Capucci
Resumo: As leishmanioses são doenças classificadas como negligenciadas e sua transmissão ocorre através da picada de fêmeas hematófagas de flebotomíneos. Sua distribuição geográfica é dependente de capacidade e se adaptar a diferentes nichos ecológicos. Existem estudos que indicam que ações antrópicas nos ecossistemas podem ocasionar na alteração da dinâmica de diversas zoonoses bem como também o seu padrão de transmissão. As leishmanioses fazem parte desse grupo de zoonoses, uma vez que possuía origem silvestre, mas nos últimos anos vem apresentando modificação no seu perfil epidemiológico, sendo encontradas em meios urbanos e peri urbanos, aumentando o risco a saúde humana e animal. Entre os anos de 2013 e 2015 o nosso grupo, realizou um estudo para analisar o cenário epidemiológico de Brumadinho frente as Leishmanioses, como resultado foram capturados 16.771 flebotomíneos de 23 espécies, sendo algumas vetores comprovadas de Leishmania spp. como: Nyssomyia whitmani, Nyssomyia intermedia e Migonemyia. Migonei. Foram realizados estudos moleculares para identificação de presença de DNA de Leishmania, sendo encontrada a circulação de Leishmania amazonensis e Leishmania braziliensis em alguns exemplares capturados. Posteriormente foi analisado a fonte alimentar das fêmeas ingurgitadas capturadas onde foi verificado que se alimentaram em cães, galinhas, seres humanos e ratos. No município de Brumadinho, localizado no estado de Minas Gerais ocorreu no ano de 2019 um dos maiores desastres ambientais no Brasil, ocasionando na liberação de rejeitos provenientes da produção mineral. Com objetivo de verificar o impacto desse desastre frente as leishmanioses na região, vamos realizar um estudo molecular comparativo com os dados obtidos antes do rompimento da barragem. Posteriormente será confeccionado um material didático, contendo informações sobre a dinâmica da enfermidade do município e medidas de prevenção e controle das leishmanioses. Diante disso, nosso objetivo é detectar DNA de Leishmania em flebotomíneos, bem como determinar determinar a fonte alimentar nas fêmeas com resquícios de sangue em seu abdômen. O município de Brumadinho (20º 08' 36" S e 44º 11' 59" W) está localizado no estado de Minas Gerais, abrangendo uma área de 639,434 km² com população total estimada de 41.208 habitantes (IBGE, 2021). O clima do município é caracterizado como clima quente, encontrando-se na zona de clima tropical Brasil central. O município faz parte de uma área territorial que integra o denominado Quadrilátero Ferrífero, região rica em campos ferruginosos, sustentando a principal base econômica de Brumadinho, as atividades de mineração, sobretudo pela atuação da Vale S.A. Apresentando em sua extensão territorial impactos ambientais causados pelas ações antrópicas. Os flebotomíneos serão coletados em 23 pontos com auxílio de armadilhas luminosas automáticas, modelo HP, durante três noites consecutivas, durante o período de março de 2022 a abril de 2023. O material coletado será armazenado em álcool 70% e posteriormente os machos serão montados líquido de Berlese e as fêmeas serão dissecadas, tendo os últimos segmentos e a cabeça colocadas em lâmina para identificação e o tórax, pernas e demais segmentos do abdômen serão armazenados para a análise molecular para detecção de DNA de Leishmania e determinação da fonte alimentar nas fêmeas ingurgitadas. Todos os espécimes capturados serão identificados através da classificação proposta por Galati (2003). As fêmeas dos flebotomíneos coletadas serão submetidas à extração total do DNA individualmente e em pool (para até dez indivíduos da mesma espécie, mesmo ponto amostral e mesmo período de captura). Posteriormente o DNA extraído será submetido à PCR convencional com amplificação do fragmento da região intergênica do DNA de Leishmania (Internal Transcribed Spacer q – ITS1). Para realizar a identificação da espécie de Leishmania, o produto amplificado será direcionado a técnica de RFLP. As fêmeas alimentadas serão dissecadas e o DNA extraído para posterior identificação de fontes alimentares através da PCR dirigida ao gene do citocromo b com a confirmação pelo sequenciamento genético.

Bolsista: EDUARDO HERNANY PANTOJA DE MACEDO
Orientador(a): FERNANDO BERTON ZANCHI
Coorientador(a): Não informado
Resumo: Docking molecular é uma técnica computacional amplamente difundida entre os atores da indústria farmacêutica pois é uma das mais poderosas ferramentas usadas na prospecção de novos fármacos e Química Medicinal. Esta técnica tem sido usada extensivamente na descoberta ou no planejamento de novos ligantes quando o alvo é uma proteína por exemplo. As ferramentas mais citadas e utilizadas são as que compõem o pacote Autodock, contudo, estas não possuem uma interface WEB amigável para facilitar os ensaios executados para usuários não especialistas em informática. Uma interface gráfica em ambiente WEB multiplicaria o número de abordagens de proposição de novos candidatos a fármacos. Atualmente os softwares citados possuem algumas interfaces gráficas para instalação. Contudo, todas são aplicações conhecidas por “aplicações desktop” pois precisam ser instaladas para um sistema operacional esepecífico e ainda necessitam de bibliotecas e algumas adaptações para que funcionem. Em outros casos, as interfaces gráficas são comercialmente inviáveis. Inspirado no sucesso de outro projeto executado pelo mesmo programa PIBIT – o VisualDynamics (http://visualdynamics.fiocruz.br/login), deseja-se disponibilizar mais uma ferramenta de prospecção de fármacos na WEB. Assim, este subprojeto pretende construir uma plataforma amigável com a construção de uma interface gráfica na WEB que possibilite o uso do Autodock e do Autodok Vina.. A linguagem utilizada será Python com framework FLASK além de Javascript, HTML e CSS para designer visual aprimorado.